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 “完美新发明”GelBlue——安全凝胶电泳新时代 

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  • Super GelRedTM, 10,000× in water

    产品货号: S2001

    产品规格: 0.5mL

    目录价(元):628

    可替代的同类产品:EB, GoldView等核酸凝胶电泳试剂

    大包装询价


产品概述:

Super GelRed 是一种高灵敏、无致突变性超安全和超稳定的荧光核酸凝胶染色试剂(在工作浓度中)。它可替代溴化乙锭 (EtBr,EB),具有远高于 EB 的灵敏度,同时不需要脱色。由于 Super GelRed 和 EB 有相同的光谱特性,因此用它替代 EB 时不需要更换成像系统。


“三高”优点 

高灵敏度:低浓度样本可清晰显色。
高稳定性:微波炉加热,室温保存。
高安全性:无致突变性,无致癌性。

Super GelRed灵敏度是EB的4倍之多:EB为5-8 ng  VS  Super GelRed为1 ng  !                                                    

可以完美的替代市场上任一款凝胶电泳核酸染料。


安全性原理分析

1.Super GelRed 分子量约有1400,难以穿过细胞膜上的通道。

2.Super GelRed 带4个正电荷,与带正电荷的细胞膜相互排斥

3.SYBR Green 、SYBR Safe 、Super GelRed 和Super GelGreen细胞膜通透性实验

在同等实验条件下,SYBR Safe和SYBR Green能够迅速渗透细胞膜并染色活细胞中的DNA,而Super GelRed与Super GelGreen无法穿透活细胞的细胞膜,对实验者而言,Super GelRed, Super GelGreen 更加安全可靠。


注意事项

1. 鉴于 Super GelRed的高灵敏性,建议减少 DNA 的上样量,推荐已知浓度样品的上样量为 50-200 ng/泳道(8 泳道的小胶孔),对于未知浓度的样品,尝试 1/3 或 1/5 的常用上样量。根据胶孔大小适当增加或降低上样量。
2. 使用胶染法时,经检测 Super GelRed 跟市面上的一些 DNA Ladder 存在不匹配的现象,因此我们推荐使用高品质 marker 品牌,如 US Everbright、Promega、Vazyme、TransGen 等。
3. 推荐用 1×TBE 缓冲液代替 TAE,因为含硼酸盐的试剂导电性更好。电泳时电压不宜过高,一般TBE不要超过120V,TAE 不要超过 100 V。
4. 染料无需低温冷藏,请于室温下储存,以避免沉淀,若发现沉淀,请将染料加热至 45-50℃,2 min,振荡溶解,不影响使用效果。

推荐:Acrylamide凝胶核酸电泳推荐使用我司 S2005 Super Page GelRed 染料,效果更佳。


说明书:


   UE-S2001

常见问题解答:


胶染法中 DNA 条带弥散,拖尾?
1.将 DNA 上样量减少至三分之一或五分之一。Super GelRed 比 EB 更加灵敏,条带的弥散或拖尾可能是超载造成的。这是 DNA ladder 的常见现象,推荐使用我司提供的与 Super GelRed 匹配性较好的 DNA ladder。
2.确保使用的染料终浓度为1×。
3.用泡染法(后染)代替胶染法(前染)。
4.使用低浓度的琼脂糖凝胶检测大片段 DNA。
5.更换电泳缓冲液,TBE 缓冲液比 TAE 缓冲液的效果好。
6.loading buffer 含有 SDS 可能会引起条带的弥散和拖尾,如果发生这种情况,建议使用泡染法


◆胶染法中 DNA 迁移率的差异?
由于 Super GelRed  的分子量较大,导致其不能进入细胞,保证了染料的安全性。但是,大分子量导致 DNA 的迁移速率可能会受到染料与 DNA 比率的影响。
1. 将 DNA 上样量减少至三分之一或五分之一。
2. 使用泡染法,避免染料在电泳过程中对迁移造成干扰。

◆荧光较弱,一段时间后染料性能降低,或使用后染法染色不均匀?
染料可能在溶液中已沉淀。
1. 加热 Super GelRed  至 45-50℃,2min,涡旋溶解。
2. 染料在室温下储存,避免沉淀。

◆Super GelRed 是否可用于单链 DNA 或 RNA 染色?
Super GelRed 可以用来染色单链 DNA 和 RNA,但是它对双链 DNA 的灵敏度是单链 DNA 或 RNA 的五倍。

◆Super GelRed  与哪些 loadingbuffer 兼容?
我们通常使用含有 15% glycerol, 7.5% Ficoll 400, 0.05% Bromophenol Blue,and 0.1% Patent Blue VF 的 6× loading buffer。在内部测试中,包含 0.1%Orange G 的 6X loading buffer 在 Super GelRed  的前染和后染中都有良好。

为什么我会看到污染或微笑的 DNA 条带或不一致的 DNA 迁移?
1.GelRed 和 GelGreen 是为安全而设计的分子量较大的高效亲和型染料,在凝胶电泳中它们可以影响 DNA 的迁移。下列建议可能会提高凝胶中的 DNA 条带分离效果。
2.减少 DNA 上样量。污染和微笑条带往往是过量的 DNA 样本造成的。推荐的泳道和已知浓度的样品的上样量为 50-200ng/泳道。对于未知浓度的样品,尝试 1/2 或 1/3 的常用上样量
3.制百分比浓度小的琼脂糖凝胶。高分子量的 DNA 在低百分比的琼脂糖凝胶分离效果比较好。
4.更换电泳缓冲液。 TBE 缓冲液比 TAE 缓冲液的效果更好。
5.为了避免染料可能对 DNA 迁移的干扰,我们建议使用电泳后染胶。如果跑胶程序需要的上样量超过推荐量,建议使用电泳后染色法。

为什么我会看到荧光弱,时间久染料性能降低,或后染染色后有一层染料在胶上?
1.染料可能从溶液中沉淀出来。
将 GelRed 或 GelGreen 溶液加热至 45-50℃,保持 2 分钟,然后涡旋溶解。在室温下储存染料以避免沉淀。
2.如果您看到凝胶的高背景染色,您使用的琼脂糖可能质量较差。 琼脂糖中的污染物可能与染料结合,导致背景增加。可以推荐使用 UE 琼脂糖(A2015)。

GelRed 和 GelGreen 有什么区别?我应该选择哪一个?
GelRed 和 GelGreen 之间的主要区别在于它们的荧光激发和发射波长不同。GelRed 具有红色荧光,类似于溴化乙锭。GelGreen 具有绿色荧光,类似于 SYBR Green 或 SYBR Safe。Gelred 与 UV 和蓝光透射仪均兼容。GelGreen 适合在蓝光透射仪下使用,使用户可以避免将自身和 DNA 样品暴露在紫外线辐射下。

为什么有 GelRed 和 GelGreen 两种溶剂(二甲基亚砜 DMSO 和水)?在 DMSO 和水中的染料是否存在差异?
水溶解的产品相对于储存在 DMSO 中,是一个全新的改良。由于 DMSO 会被皮肤吸收,我们建议染料溶于水,以避免处理二甲基亚砜存在的潜在危害。鉴于有些工业用户不希望改变实验方案,我们将继续提供储存在DMSO 的染料。经过内部测试,两种溶剂方案的效果完全一样。

GelRed 和 GelGreen 用后应该如何处置?
GelRed 和 GelGreen 通过 EPA 环保监管局 22 个指标测试。GelRed 和 GelGreen 已经被相关部门批准,可以直接倾倒入下水道。然而,由于地方规定的差异,您可以请联系您当地的安全监管部门,获取相关条例。详情请查阅 Biotium 公司 GelRed / GelGreen 安全报告信息。UE 所生产 Super GelRed 和 GelGreen 和 Biotium 公司所产两款产品完全等同。UE 公司的 GelRed 也通过了水生动物的实验,完全可以直接排入下水道。

可以提前制作 GelRed/GelGreen 凝胶,储存供以后使用吗?
可以,Super GelRed 和 GelGreen 染料是稳定的。在保证琼脂糖凝胶的完整性不会被破坏的前提下,你可以将预制的 Super GelRed / GelGreen 凝胶储存供以后使用。 我们建议在 4℃ 避光贮存凝胶。

GelRed/GelGreen 后染法染色液可以重复使用吗?
可以。但是,如果灵敏度降低,请使用新鲜的染料溶液。

GelRed/GelGreen 是否与克隆、连接和测序等下游应用兼容?
是。我们建议使用UE DNA 纯化回收试剂盒(D2022)从 DNA 中去除染料。

 GelRed/GelGreen 可否用于染色 sDNA 或 RNA 吗?
可以,但 Super GelRed 对单链核酸的敏感性比 GelGreen 约高 5 倍。 使用荧光酶标仪的滴定测定显示,与 ssDNA 和 RNA 结合的 Super GelRed 的荧光信号约是与 dsDNA 结合的一半。

我应该在我的 6×DNA loading buffer 中加入多少 Super GelRed/GelGreen ?
我们不建议将 GelRed/GelGreen 直接添加到 loading 缓冲液中,因为这会导致条带迁移不准确。 UE 提供 6×Super GelRed Prestain Loading Buffer(S2006),专为此应用而设计,但我们不推荐用于需要精确确定 DNA 大小的应用。 为了最准确地确定 DNA 条带大小,我们建议使用 GelRed 后染法(详情请参阅 Super GelRed 使用说明书)。

GelRed/GelGreen 的检测下限是多少?
GelRed/GelGreen 是超敏感染料。 一些用户报告能够检测含有少于 0.1 ng DNA 的条带。 但是,染色的灵敏度取决于仪器功能和曝光设置。


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