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  买染料送蓝光切胶仪开启安全凝胶电泳新时代          【新品】低丰度蛋白检测神器-TSA免疫荧光技术

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  • Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒)

    产品货号: S6009

    产品规格: 100 mL/500 mL

    目录价(元):800/3600

    可替代的同类产品:市面上各类ECL试剂盒

    大包装询价


产品概述:

储存条件
4℃密封避光保存一年以上,短期可放置室温。

产品描述
Super ECL Plus 免疫印迹底物是增强型化学发光(ECL)HRP 底物,可帮助用户在免疫印迹分析过程中实现低皮克级的蛋白检测。
Super ECL Plus 底物可为使用辣根过氧化物酶(HRP)偶联物的免疫印迹实验提供明亮的信号和低皮克级检测灵敏度。该 ECL 底物能够兼容各种膜、封闭液和宽范围抗体稀释液,以出色性能、通用性和高性价比,满足用户的免疫印迹应用需求。

注意事项
1. 步骤 1~4 可在日光灯下操作,但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。
2. 长时间曝光或蛋白过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系,曝光不足则条带模糊。
3. 发光工作液孵育约 3 min 后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见,低丰度蛋白条带发光较弱甚至肉眼不可见但可使 X 光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使 X 光胶片感光,因而弱带可曝光 1-10 h。如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 发光和曝光。
4. 由于超敏发光液极其灵敏,强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗 1:1000~1:5000,二抗 1:20,000~1:100,000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带,导致失败。
5. 某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。
6. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。
7. NaN 3 能抑制HRP 活性,回收第二抗体应避免使用NaN 3 ,如必需使用勿超过 0.01%。


说明书:


    UE-S6009

常见问题解答:


发光液用DAB显色好还是用ECL好?
1.一般DAB主要用于免疫组化显色,然后在显微镜下观察;ECL主要用于western blot,内含过物氧化酶作用底物,化学发光由暴光底片感光,并用于结果分析。
2.做western blot实验 ECL的敏感性比DAB染色要强的多。 

为什么目的条带信号弱?
1.优化一抗和二抗的工作浓度;
2.增加曝光时间,如必要可过夜曝光;
3.更换亲和力更高的抗体;
4.检查两种ECL试剂是否交叉污染。

为什么用ECL显色后背景很脏?
1.没有洗干净(使用PBST或者TBST);
2.一抗浓度过大,可以降低一抗浓度;
3.二抗浓度过大;
4.封闭时间短;
5.抗体稀释液效果不好。

ECL显色液显色后,为什么会出现空心现象?
可能是由于蛋白浓度过高或者二抗浓度过高导致底物消耗过快,出现空心情况,建议客户降低蛋白浓度或二抗浓度。

ECL显色液显色,刚开始曝出条带,隔几分钟后再次曝光无条带?
可能是由于一抗浓度太大,导致与二抗结合的HRP短时间内将ECL反应完,建议降低抗体浓度。

引用及参考文献:


1.CtIP promotes G2/M arrest in etoposide‐treated HCT116 cells in a p53‐independent manner
Hongyu Chen,Jin Shan,Dandan Chen,Ruoxi Wang,Wenjing Qi,Hailong Wang,Yueshuang Ke,Wenguang Liu,Xianlu Zeng
Journal of cellular physiology(2018)

2.Meningitic Escherichia coli-induced upregulation of PDGF-B and ICAM-1 aggravates blood-brain barrier disruption and neuroinflammatory response
Rui-Cheng Yang,Xin-Yi Qu,Si-Yu Xiao,Liang Li,Bo-Jie Xu,Ji-Yang Fu,Yu-Jin Lv,Nouman Amjad,Chen Tan,Kwang Sik Kim,Huan-Chun Chen andXiang-Ru Wang
Journal of Neuroinflammation(2019 16:101)

3.Melatonin enhances thrombopoiesis through ERK and Akt activation orchestrated by dual adaptor for phosphotyrosine and 3‐phosphoinositides
Shilei Chen,Yan Qi,Song Wang,Yang Xu,Mingqiang Shen,Mengjia Hu,Changhong Du,Fang Chen,Mo Chen,Yukai Lu,Zihao Zhang,Yong Quan,Cheng Wang,Fengchao Wang,Junping Wang
J Pineal Res

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