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 细胞骨架染料——YF-鬼笔环肽   新品上市:Annexin V-PE and RedNucleus Ⅱ Apotosis Detection Kit      线粒体红色荧光探针MitoScene™ Red CMXRos

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  • Rhea ECL (普通型化学发光检测试剂盒)

    产品货号: S6038

    产品规格: 100 mL/500 mL

    价格(元): 500/2200

    可替代的同类产品
产品概述:

储存条件:

4℃密封避光保存一年以上,短期可放置室温。

 

产品描述:
Rhea ECL 免疫印迹底物是用于增强型化学发光(ECL)的入门级过氧化物酶底物,性价比极高,可直接替代昂贵的产品而无需对实验条件进行任何优化。
Rhea ECL 免疫印迹底物适用于辣根过氧化物酶(HRP)的检测,与其他标准增强型化学发光底物相比,性能同样可靠,但成本更低。由于该底物采用了与其它品牌的底物产品相同的鲁米诺和过氧化物酶配方,因此用户无需对检测条件或孵育方案进行任何优化,从而大大节约成本。


注意事项:
1. 步骤 1~4 可在日光灯下操作,但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。
2. 长时间曝光或蛋白过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系,曝光不足则条带模糊。
3. 发光工作液孵育约 3 min 后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见,低丰度蛋白条带发光较弱甚至肉眼不可见但可使 X 光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使 X 光胶片感光,因而弱带可曝光 1-10 h。如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 发光和曝光。
4. 由于发光液极其灵敏,强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗 1:1000~1:4000,二抗 1:5000~1:10000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带,导致失败。
5. 某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。
6. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。
7. NaN 3 能抑制HRP 活性,回收第二抗体应避免使用NaN 3 ,如必需使用勿超过 0.01%。


说明书:
                 UE-S6038
引用及参考文献:
发光液用DAB显色好还是用ECL好?
1.一般DAB主要用于免疫组化显色,然后在显微镜下观察;ECL主要用于western blot,内含过物氧化酶作用底物,化学发光由暴光底片感光,并用于结果分析。
2.做western blot实验 ECL的敏感性比DAB染色要强的多。 

为什么目的条带信号弱?
1.优化一抗和二抗的工作浓度;
2.增加曝光时间,如必要可过夜曝光;
3.更换亲和力更高的抗体;
4.检查两种ECL试剂是否交叉污染。

为什么用ECL显色后背景很脏?
1.没有洗干净(使用PBST或者TBST);
2.一抗浓度过大,可以降低一抗浓度;
3.二抗浓度过大;
4.封闭时间短;
5.抗体稀释液效果不好。
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