中文 ENGLISH

细胞检测新品:NO、ROS、CFDA SE增殖与示踪          “完美新发明”GelBlue——安全凝胶电泳新时代         【新品】低丰度蛋白检测神器-TSA免疫荧光技术

  • LipoGene™ 2000 Star Transfection Reagent(低毒款)

    产品货号: L7002

    产品规格: 0.75 mL/1.5 mL

    目录价(元):1600/3000

    可替代的同类产品:Lipofectamine 2000,Fugene HD等转染试剂

    大包装询价


产品概述:

储存条件
4℃保存,一年有效(避免冷冻)。

产品介绍
LipoGene TM 2000 Star Transfection Reagent 是一种非常高效的新型转染试剂,细胞毒性更低,转染效果更佳,达到了国际最主流转染试剂的转染效果。适用于把质粒、siRNA 或其它形式的核酸包括 DNA、RNA、寡核苷酸转染到真核细胞中。
LipoGene TM 2000 Star Transfection Reagent 对于常见的哺乳动物细胞具有非常高的转染效率、重复性好、操作简单、无明显的细胞毒性,并且对于贴壁细胞和悬浮细胞都适用。
LipoGene TM 2000 Star Transfection Reagent 转染试剂的使用方法和常用的 Lipofectamine®2000 Reagent 完全一致,转染效率比 Lipofectamine® 2000 Reagent 更高。
LipoGene TM 2000 Star Transfection Reagent 转染试剂不仅适用于质粒、siRNA 等单一成分的细胞转染,也适合多个质粒或者质粒与 siRNA 等的组合转染。
LipoGene TM 2000 Star Transfection Reagent 转染试剂转染过表达质粒后,通常 24-48 h 后达到较高的蛋白表达水平,并且很多情况下蛋白表达量在转染后 48 h 显著高于转染后24 h;转染 siRNA 通常 3-5 天后对于目的基因的下调水平会比较理想。
LipoGene TM 2000 Star Transfection Reagent 转染试剂转染细胞时,基本不受细胞培养液中血清影响,即可以在血清存在的情况下进行细胞转染。但为了取得最佳的转染效果,推荐转染时使用不含抗生素培养液。转染后不必去除转染液,或者改变或添加培养基,但转染 4-6 h 后可去除转染液。

注意事项
1. 使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率。
2. 转染前细胞必须处于良好的生长状态。
3. 需自备不含抗生素的无血清培养液或 Opti-MEM®培养液或普通的 DMEM 培养液。
4. LipoGene TM 2000 Star Transfection Reagent 转染试剂不能vortex 或离心,宜缓慢晃动混匀。
5. LipoGene TM 2000 Star Transfection Reagent 转染试剂使用后请立即盖好盖子,避免长时间暴露在空气中,影响转染效率。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:


   UE-L7002

常见问题解答:


转染效率问题
不同细胞转染效率有所差别经过测试,我们转染效果较好的有:293、293FT、Hela、HO1980、A549、MEF、TS细胞、HCT116、CHO等

◆细胞密度和传代数是否是转染的重要考虑因素?
是的,细胞密度是影响转染效率的重要参数。如果密度太低,转染试剂对细胞的毒性会比较大。如果细胞密度高,可能会观察到低于预期的转染效率。细胞密度在60%至80%时具有出色的转染效率。传代次数可能会影响转染实验,过多的传代次数可能会降低转染性能。我们建议细胞分裂不超过30代。如果转染性能下降,并且细胞已长期培养或过度/不正确传代,我们建议您重新复苏细胞。

◆转染期间可以在培养基中使用抗生素吗?
抗生素可以用于培养细胞系的培养基中。 但是,我们不建议在转染培养基中使用抗生素,除非事先在转染的细胞类型中进行过测试。因为抗生素会影响转染效率。

◆如何选择
L7002L7003
L7002低毒款L7003高效款。如果您的细胞对毒性比较敏感,建议选择L7002,如果您的细胞对毒性不敏感,比如一些癌细胞,建议选择L7003.

◆转染试剂的稳定性如何?
我们的转染试剂是在4℃条件下储存的。如果贮存和使用得当,除了管子标签或者产品COA文件中有特别标注外,我们保证从收到产品之日起一年内产品的性能正常。我们不推荐冻存转染试剂,因为冻存会降低转染效果。

◆反向转染与正向转染之间区别是什么?该如何选择?
在正向转染过程中,细胞铺于培养孔之中,用通常的方式制备转染复合物并在第二天将其加入细胞培养物中。在反向转染过程中,在培养孔之中制备转染复合物,之后再加入细胞与培养基。反向转染比正向转染过程更迅速,因此是高通量转染的理想之选。在非高通量的转染操作中,通常正向转染对于大多数类型的细胞转染效果更佳。

◆我可以用该试剂来共转染质粒吗?
可以。标准转染实验方案需要保持转染混合物中DNA的总量恒定。也就是说,如果您的试验方案需要1 mg的质粒,则两种共转染质粒各使用0.5 mg,或是4种共转染质粒各使用0.25 mg。当利用共转染对不同的质粒引入选择性标记时,我们建议使用摩尔比3:110:1,目标质粒比选择质粒过量,以确保目标质粒和选择质粒同时存在。

◆为什么我的转染实验不具有可重复性?
一般情况下,无论如何尝试控制转染影响因素,两次转染的效率仍会表现出一定程度的差异性。转染时,请保持所有转染影响因素,如细胞铺板密度、传代次数和生长期一致。尽可能解冻新的细胞。为了尽量减少转染差异的影响,可以使用内参,如β半乳糖苷酶或萤光素酶。可以共转染表达质粒和参考质粒,分析β-gal或荧光素酶的活性。

◆为获得最佳转染效果,转染时应注意什么?
1.  转染时的细胞密度应处于60%80%的汇合度。细胞应处于对数生长中期。为了确保在实验组间获得最为稳定的结果,建议您最好能够在实验开始时优化细胞铺板密度。
2. 优化阳离子脂质试剂和DNA的用量。除细胞状态以外最重要的因素是脂质体:DNA的比率。
3. 在配制用于DNA-阳离子脂质体复合物形成的培养基中不要使用抗生素、EDTA、柠檬酸盐、磷酸盐、硫酸软骨素、透明质酸、硫酸葡聚糖或其他硫酸蛋白聚糖。
4. 不要使用冰冻过的,或在温度低于4°C的冰箱隔间中储存的阳离子脂质试剂。
5. 请确保转染DNA中的启动子-增强子能够兼容靶标细胞类型。


引用及参考文献:


1.Spotted knifejaw (Oplegnathus punctatus) MyD88: Intracellular localization, signal transduction function and immune responses to bacterial infection
Xiaobing Liu,Xuemei Li,Xinxin Du,Minmin Sun,Xuangang Wang,Wensheng Li,Jieming Zhai,Jinxiang Liu,Haiyang Yu,Quanqi Zhang.
Fish & Shellfish Immunology(2019)
应用方向:质粒转染HEK-293T cells

2.Severe Fever With Thrombocytopenia Syndrome Virus-Induced Macrophage Differentiation Is Regulated by miR-146
Li Zhang, Yuxuan Fu1, Huanru Wang, Yajie Guan, Weiwen Zhu, Mengdi Guo, Nan Zheng and Zhiwei Wu
Frontiers in immunology(2019)
应用方向:质粒转染THP-1细胞

返回顶部

更多>> 技术支持

  • 地址:苏州市相城经济开发区观塘路1号 C座10F
  • 电话:1号技术18551299082、2号技术18551296769、3号技术18551290363
  • 电话:1号销售18551296519、2号销售13182673060、1号销售(工业)18551290335、2号销售(工业)18551290365、3号销售(工业)18551296656

在线
客服

客服
热线

客服热线
0512-69571710、18551296680

1号技术热线 185512990822号技术热线 185512967693号技术热线 185512903631号销售(渠道) 185512965192号销售(渠道) 131826730601号销售(工业) 185512903352号销售(工业) 185512903653号销售(工业) 18551296656

关注
微信

微信服务号
顶部